現有的雙光束光度計一般分為單波長雙光束和雙波長雙光束兩種類型，但是絕大多數的雙光束儀器都是屬于單波長雙光束。單波長雙光束是從單色器射出的單色光被半透半反鏡或切光器分裂為雙光束，這就是雙光束形成的過程。在雙光束類型的儀器中，兩束光的強度各為50%，且通過樣品室，一束光為樣品道用，另一束光為參比道用。
　　雙光束光度計的優(yōu)點：首先，消除了光源不穩(wěn)定和放大器增益變化以及光學和電子學元器件對兩條光路不平衡的影響；其次，可以自動扣除空白背景，從而提高了儀器的穩(wěn)定性，使漂移減小，基線平直度提高，提高分析準確度。然后是比例雙光束，它與雙束光的不同是：光按比例分開，一般樣品光束強度大于參比光束，其目的是提高信噪度。因為樣品的濃度總是大于參比液，所以樣品光束需要的強度大一些。比例雙光束的特點：與雙光束性能基本一致，只是不能自動扣除樣品空白，需要手動扣除。
　　總得來講，雙光束光度計的優(yōu)點是雙光束同時檢測樣品光路和背景光路，可以扣除背景波動的影響，而單光束要達到同樣的效果需要經常校零。
　　雙光束光度計作為現代分析領域常用的工具，可廣泛應用于生命科學、化工、制藥、質量檢驗、環(huán)境保護等方面。雙光束光度計提供了較高的性能，使用方便可靠，應用范圍很廣。
　　雙光束光度計操作規(guī)程
　　1.接通電源，打開雙光束光度計開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。
　　2.將靈敏度開關調至“1”檔（若零點調節(jié)器調不到“0”時，需選用較。）
　　3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。
　　4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。
　　5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數盤指針指向t=0處。
　　6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)“100”調節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。
　　7.比色完畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。